מהו מבחן קריוטיפ וכיצד הוא נעשה?

מטרה וצעדים המעורבים במבחן קריוטיפ

אם הרופא שלך המליץ ​​על בדיקת קריוטיפ עבורך או לילדך, או לאחר בדיקת מי שפיר, מה הבדיקה הזו כרוכה? אילו תנאים עשוי הקארוטיפ לאבחן, מהם הצעדים הכרוכים בבדיקות ומהם המגבלות?

מהו מבחן קריוטיפ?

קריוטיפ הוא תצלום של הכרומוזומים בתא . ניתן לקלוט קריוטיפים מתאי דם, תאי עור עובריים (נוזל מי השפיר או השליה) או תאי מוח עצם.

אילו תנאים ניתן לאבחן באמצעות בדיקת קריוטיפ?

Karyotypes ניתן להשתמש כדי לבדוק ולאשר abnormalities כרומוזומליות כגון תסמונת דאון, ויש כמה סוגים שונים של חריגות אשר עשוי להיות מזוהה.

אחד מהם הוא trisomies שבו ישנם שלושה עותקים של אחד הכרומוזומים ולא שניים. לעומת זאת, מונוזומים מתרחשים כאשר קיים רק עותק אחד (במקום שניים). נוסף על טריזומים ומונוזומים יש מחיקות כרומוזומיות שבהן חסר חלק בכרומוזום, ותרגומים כרומוזומים, שבהם חלק כרומוזום אחד מחובר לכרומוזום אחר (ולהיפך בתרגומים מאוזנים).

דוגמאות של trisomies כוללים:

• תסמונת דאון (trisomy 21)
• תסמונת אדוארד ( טריזומיה 18 )
• תסמונת Patau (trisomy 13)
• תסמונת קלינפלטר (XXY ווריאציות אחרות) - תסמונת קלינפלטר מתרחשת ב -1500 זכרים חדשים ונראה כי היא גדלה בשכיחות

• תסמונת X טריפל (XXX)

דוגמה למונוזומיה כוללת:

• תסמונת טרנר (X0) או מונוזומיה X - בערך 15% מהפלות נגרמות עקב תסמונת טרנר, אך טריזומיה זו קיימת רק בסביבות 1 בשנת 2000 לידות חי

דוגמאות למחיקות כרומוזומאליות כוללות:

• Cri-du-Chat תסמונת (חסר כרומוזום 5)

• סינדרום ויליאמס (חסר כרומוזום 7)

תרגום - ישנן דוגמאות רבות של translocations כולל טרנסלוקציה תסמונת דאון. תרגומים רוברטסוניים הם שכיחים למדי, המתרחשים בערך 1 מתוך 1000 אנשים.

Mosaicism הוא מצב שבו כמה תאים בגוף יש הפרעות כרומוזומליות בעוד אחרים לא. לדוגמה, תסמונת דאון פסיפס או tresomy פסיפס 9. מלא trisomy 9 אינו תואם את החיים, אבל trasomy פסיפס 9 עלול לגרום ללידה חי.

(דוגמה שווה אלף מילים, למד על ההבדלים בין טרנסלוקציה, טריזומיה ותסמונת דאון פסיפס ).

מתי נעשה קריוטיפ?

ישנם מצבים רבים בהם עשוי להיות מומלץ על ידי קריוטיפ על ידי הרופא שלך. אלה עשויים לכלול:

• תינוקות או ילדים שיש להם מצבים רפואיים המצביעים על חריגה כרומוזומלית שטרם אובחנה.
• מבוגרים הסובלים מסימפטומים המרמזים על אי-נורמליות כרומוזומלית (לדוגמה, גברים עם מחלת קלינפלטר עלולים לעבור אבחנה עד גיל ההתבגרות או ההתבגרות). חלק מהפרעות הטריזומיה של הפסיפסום עשויות גם הן להיות לא מאובחנות.
• אי פוריות - קריוטיפ גנטי יכול להיעשות על אי פוריות. כפי שצוין לעיל, כמה חריגות כרומוזומליות עלול ללכת מאובחנים עד בגרות. אישה עם תסמונת טרנר או גבר עם אחד הווריאנטים של Klinefelter של לא יכול להיות מודע למצב עד שהם מתמודדים עם בעיות פוריות.

• בדיקות טרום לידתי - במקרים מסוימים, כגון טרנסלוקציה תסמונת דאון, המצב עשוי להיות תורשתית והורים יכולים להיבדק אם ילד נולד עם תסמונת דאון. (חשוב לציין כי רוב הזמן תסמונת דאון אינו הפרעה תורשתית אלא מוטציה סיכוי).
• לידות מת - קריוטיפ נעשה לעיתים קרובות כחלק מהבדיקות לאחר הלידה המתה.
• הפלות חוזרות ונשנות - הקאריוטיפ ההורי של הפלות חוזרות ונשנות עשוי לתת רמזים באשר לסיבות להפסדים חוזרים ונשנים אלה. זה חשב כי chromosomal abnormalities, כגון trisomy 16 הם הגורם של לפחות 50 אחוזים של הפלות.

• לוקמיה - בדיקת קריוטיפ עשויה להיעשות גם על מנת לסייע לאבחון לוקמיה, למשל על ידי חיפוש הכרומוזום של פילדלפיה שנמצא אצל אנשים עם לוקמיה מיאלוגנית כרונית או לוקמיה לימפוציטית חריפה.

צעדים המעורבים במבחן קריוטיפ

בדיקת קריוטיפ עשויה להישמע כמו בדיקת דם פשוטה, מה שהופך אנשים רבים לתהות מדוע זה לוקח כל כך הרבה זמן כדי לקבל את התוצאות. בדיקה זו היא די מורכבת לאחר האוסף. בוא נסתכל על השלבים הבאים כדי שתוכל להבין מה קורה בזמן שאתה מחכה למבחן.

1. אוסף דוגמאות

הצעד הראשון בביצוע קריוטיפ הוא לאסוף מדגם. אצל יילודים נאסף דגימת דם המכילה תאי דם אדומים, תאי דם לבנים, סרום ונוזלים אחרים. קריוטיפ ייעשה על כדוריות הדם הלבנות אשר מתחלקות באופן אקטיבי (מצב המכונה מיטוזה). במהלך ההיריון, המדגם יכול להיות נוזל מי השפיר הנאסף במהלך בדיקת מי שפיר או פיסת השליה שנאספה במהלך בדיקת דגימה ווריית (CVS). מי השפיר מכיל תאי עור עובריים המשמשים ליצירת קריוטיפ.

2. תחבורה למעבדה

קריוטיפים מבוצעים במעבדה ספציפית הנקראת מעבדה לציטוגנטיקה - מעבדה אשר בוחנת כרומוזומים. לא לכל בתי החולים יש מעבדות ציטוגנטיקה. אם בית החולים שלך או מתקן רפואי אין מעבדה cytogenetics משלו, המדגם הבדיקה יישלח למעבדה המתמחה ניתוח קריוטיפ. מדגם הבדיקה מנותח על ידי טכנאים ציטוגנטיים מאומנים במיוחד, Ph.D. ציטוגנטיקאים, או גנטיקאים רפואיים.

3. הפרדת התאים

כדי לנתח את הכרומוזומים, המדגם חייב להכיל תאים המתחלקים באופן אקטיבי. בדם, תאי הדם הלבנים מתחלקים באופן פעיל. רוב התאים עובריים פעיל לחלק גם כן. לאחר המדגם מגיע המעבדה cytogenetics, תאים שאינם מחולקים מופרדים תאים חלוקת באמצעות כימיקלים מיוחדים.

4. גידול תאים

על מנת שיהיה מספיק תאים לנתח, התאים המחלקים גדלים במדיה מיוחדת או בתרבית תאים. מדיה זו מכילה כימיקלים והורמונים המאפשרים לתאים לחלק ולהתרבות. תהליך זה של culturing יכול לקחת שלושה עד ארבעה ימים עבור תאי הדם, ועד שבוע עבור תאים עוברית.

5. סנכרון תאים

כרומוזומים הם שרשרת ארוכה של DNA אנושי. כדי לראות את הכרומוזומים תחת מיקרוסקופ, הכרומוזומים צריכים להיות בצורה הכי קומפקטית שלהם בשלב של חלוקת התא (מיטוזה) המכונה metaphase. על מנת לקבל את כל התאים בשלב ספציפי זה של חלוקת התא, התאים מטופלים עם כימי אשר מפסיק חלוקת התא בנקודה שבה הכרומוזומים הם קומפקטי ביותר.

6. שחרור הכרומוזומים מתאיהם

כדי לראות את הכרומוזומים הקומפקטיים האלה מתחת למיקרוסקופ, הכרומוזומים חייבים להיות מחוץ לתאי הדם הלבנים. זה נעשה על ידי טיפול בתאי הדם הלבנים עם פתרון מיוחד שגורם להם להתפוצץ. זה נעשה כאשר התאים נמצאים על שקופית מיקרוסקופית. שרידי השאריות מתאי הדם הלבנים נשטפים, משאירים את הכרומוזומים תקועים בשקופית.

7. מכתים את הכרומוזומים

הכרומוזומים הם חסרי צבע. כדי לספר כרומוזום אחד מהשני, צבע מיוחד הנקרא צבע Giemsa מוחל על השקופית. Giemsa כתמי צבע אזורים של כרומוזומים עשירים בסיסים אדנין (A) ו תימין (T). כאשר מוכתמים, הכרומוזומים נראים כמו מחרוזות עם להקות אור כהה. לכל כרומוזום יש דפוס מסוים של להקות אור כהות המאפשרות לציטוגנטיקאי לספר כרומוזום אחד לאחר. כל הלהקה כהה או אור כוללת מאות גנים שונים.

8. ניתוח

לאחר הכרומוזומים מוכתמים, השקופית היא לשים מתחת למיקרוסקופ לניתוח. לאחר מכן נלקחת תמונה של הכרומוזומים. בסוף הניתוח ייקבע המספר הכולל של הכרומוזומים והכרומוזומים מסודרים לפי גודל.

9. ספירת כרומוזומים

הצעד הראשון של הניתוח הוא ספירת הכרומוזומים. לרוב בני האדם יש 46 כרומוזומים. לאנשים עם תסמונת דאון יש 47 כרומוזומים. זה גם אפשרי עבור אנשים יש כרומוזומים חסרים, יותר כרומוזום אחד נוסף, או חלק כרומוזום כי הוא חסר או משוכפל. על ידי הסתכלות על מספר הכרומוזומים, ניתן לאבחן מצבים שונים, כולל תסמונת דאון.

10. מיון כרומוזומים

לאחר קביעת מספר כרומוזומים, cytogeneticist יתחיל מיון הכרומוזומים. כדי למיין את הכרומוזומים, ציטוגנטיסט ישווה את אורך הכרומוזום, את המיקום של centromeres (האזורים שבהם שני כרומטידים מחוברים), ואת המיקום ואת הגדלים של G- להקות. זוגות הכרומוזומים ממוספרים מהגדולים (מספר 1) לקטן (מספר 22). ישנם 22 זוגות של כרומוזומים, הנקראים אוטוזומים, שמתאימים בדיוק. יש גם את כרומוזומי המין, לנקבות יש שני כרומוזומי X ואילו לגברים יש X ו- Y.

11. התבוננות במבנה

בנוסף להסתכל על המספר הכולל של הכרומוזומים וכרומוזומי המין, הציטוגנטיקאי יבחן גם את המבנה של הכרומוזומים הספציפיים כדי לוודא שאין חומר חסר או נוסף, כמו גם חריגות מבניות כמו טרנסלוקציות. טרנסלוקציה מתרחשת כאשר חלק כרומוזום אחד מחובר כרומוזום אחר. במקרים מסוימים, שני pieced של כרומוזומים הם interchanged (טרנסלוקציה מאוזנת) ופעמים אחרות תוספת חתיכה נוסף או חסר כרומוזום אחד לבד.

התוצאה הסופית

בסופו של דבר, הקאריוטיפ הסופי מראה את המספר הכולל של כרומוזומים, המין, וכל הפרעות מבניות עם כרומוזומים בודדים. תמונה דיגיטלית של הכרומוזומים נוצרת עם כל הכרומוזומים מסודרים לפי מספר.

גבולות בדיקת קריוטיפ

חשוב לציין כי בעוד בדיקות קריוטיפ יכול לתת מידע רב על כרומוזומים, בדיקה זו לא יכול להגיד לך אם מוטציות גנים ספציפיים, כגון אלה הגורמים סיסטיק פיברוזיס , נוכחים. היועץ הגנטי שלך יכול לעזור לך להבין מה הן בדיקות קריוטיפ יכול להגיד לך ומה הם לא יכולים. מחקרים נוספים נדרשים כדי להעריך את התפקיד האפשרי של מוטציות גנטיות במחלות או הפלות.

חשוב גם לציין כי לפעמים בדיקות קריוטיפ לא יוכלו לזהות כמה הפרעות כרומוזומליות, כגון כאשר פסיפס השליה קיים.

העתיד

בשלב הנוכחי, בדיקות קריוטיפ בסביבה לפני הלידה הוא פולשני למדי, הדורש מי שפיר או דגימות ווריוס מקורי. מחקרים מתקיימים בהערכת DNA ללא תאים בדגימת דם של האם כאלטרנטיבה פחות פולשנית לאבחון טרום לידתי של הפרעות גנטיות בעובר.

השורה התחתונה על מחכה תוצאות הקאריאוטיפ שלך

בזמן ההמתנה לתוצאות הקאריאוטיפ שלך אתה עלול להיות מודאג מאוד, ואת השבוע או שניים זה לוקח לקבל תוצאות יכול להרגיש כמו עידנים. קח את הזמן הזה להישען על חברים ובני משפחה. למידה על כמה תנאים הקשורים כרומוזומים חריגים עשוי גם להיות מועיל. למרות שרבים מן התנאים שאובחנו עם קריוטיפ יכולים להיות הרסניים, ישנם אנשים רבים החיים עם תנאים אלה שיש להם איכות חיים מצוינת.

> מקורות

• > קומאר, וינאי, אבו ק. עבאס וג'ון סי. אסטר. רובינס וקוטראן בסיס פתולוגי של מחלות. פילדלפיה: Elsevier-Saunders, 2015. הדפסה.
• > נורטון, מ 'וב' רינק. שינוי אינדיקציות לבדיקה פולשנית בעידן של הקרנה משופרת. סמינרים בפרינטולוגיה . .01) 1 (: 56-66.
• > Shah, M., Cinnioglu, C., Maisenbacher, M., Comstock, I., Kort, J., and R. Lathi. השוואה בין ציטוגנטיקה וקריאוטיפ מולקולרי לבדיקות כרומוזום של דגימות מפלה. פוריות ועקרות . 2017. 107 (4): 1028-1033.